NIBSC 07/278 流感抗A(标准品)

1. 预期用途

流感抗血清试剂 07/278 在绵羊中制备，用于 A/mallard/1Netherlands/12/2000 抗原的单径向扩散测定。每次检测都应包含适当的 NIBSC 抗原试剂。

2. 注意
NIBSC 07/278 流感抗A(标准品) 不适用于人类食物链中的人类或动物。

该材料不是人或牛来源。与所有生物来源的材料一样，这种制剂应被视为对健康有潜在危害。应根据您自己实验室的安全程序使用和丢弃它。此类安全程序应包括戴防护手套和避免产生气溶胶。打开安瓿或小瓶时应小心谨慎，以免割伤。

3. 单元

没有为该材料分配单元。

4. 内容

生物材料原产国：英国。

抗血清在绵羊 SH474 和 SH475 中制备为 HGR 的纯化 HA，NIBRG 60（来自 A/mallard/Netherlands/12/2000）。通过用菠萝蛋白酶处理从灭活和纯化的病毒中提取 HA 抗原，并通过蔗糖梯度（Brand，CN 和 Skehel, JJ, Nature, New Biology, 1972, 238, 145-147)。 SH474 和 SH475 的免疫计划如下：肌肉内注射一剂约 50 µg 的 HA 和弗氏*佐剂，两周后在弗氏不*佐剂 (FIA) 存在下注射一剂 10 µg 的 HA，三每周间隔给予包括 FIA 在内的另外 10μg 剂量。初次免疫后六周，收集血清并加入NaN3（0.05% w/v）。血清 SH474 和 SH475 通过维持 pH5.49 或更低 40 分钟进行处理，然后恢复原始 pH。将它们汇集并用含有NaN3(0.05% w/v) 的磷酸盐缓冲盐水稀释并装入 2ml 体积的小瓶中

5. 存储

+2-8ºC

请注意：由于冻干材料固有的稳定性，NIBSC 可能会在环境温度下运输这些材料。

6. 开瓶指南

NIBSC 07/278 流感抗A(标准品)  样品瓶有一个“上翻式"圆形瓶盖。无论是在瓶盖上还是在小瓶的套环上，都标有撬开瓶盖的位置。这暴露了塞子的一个区域，通过该区域重构和可以使用皮下注射针头和注射器提取制剂。如果首先使用移液器，则使用镊子等*取下金属项圈，戴上合适的手套注意避免割伤。取下塞子以便进入。应注意防止内容物丢失。

7. 材料的使用

对于 1ml 中含有 20-50μg HA 活性的抗原的测定，应将 20μl 未稀释的试剂添加到 1ml 琼脂糖中。

通过将 10μl 试剂加入 1ml 琼脂糖中来测定较低浓度的抗原（5-20μg HA/ml）。可能需要根据当地实验室条件改变抗血清浓度。抗血清试剂 07/278 应按照 Wood JM、Schild GC、Newman RW 和 Seagroatt VA 描述的方法使用。