NIBSC 16/182 流感抗-A(标准品)

1. 预期用途

流感抗血清试剂 16/182 使用适当的 NIBSC 抗原试剂制备用于 A/Hong Kong/4801/2014 样抗原的单次径向扩散测定。使用 A/Hong Kong/4801/2014 样病毒的纯化 HA 在绵羊 652、653、656 和 657 中制备抗血清试剂。通过用菠萝蛋白酶处理从纯化的病毒中提取 HA 抗原并通过在蔗糖梯度上沉降来纯化 (Brand, CN and Skehel, JJ, Nature, New Biology, 1972, 238, 145-147。

2. 注意

NIBSC 16/182 流感抗-A(标准品) 不适用于人类或动物人类食物链。

该材料不是人或牛来源。与所有生物来源的材料一样，这种制剂应被视为对健康有潜在危害。应根据您自己实验室的安全程序使用和丢弃它。此类安全程序应包括戴防护手套和避免产生气溶胶。打开安瓿或小瓶时应小心谨慎，以免割伤。

3. 单元

没有为该材料分配单元。

4. 内容

生物材料原产国：英国。

绵羊 652 的免疫计划如下：肌肉注射一剂约 50 µg A/Hong Kong/4801/2014 样病毒 NYMCX-263B HA 和弗氏*佐剂 (FCA)，两周后用 10微克剂量的 NYMCX-263B HA，包括弗氏不*佐剂 (FIA)。每周间隔给予另外三剂 10 微克剂量的 NYMCX-263B HA，包括 FIA。初次免疫后六周，收集血清并加入NaN3（0.05% w/v）。

绵羊 653、656 和 657 的免疫计划如下：

肌肉内给予一剂约 50 µg A/Hong Kong/4801/2014 样病毒 NYMCX-263B HA 和 FCA，两周后给予 10 微克剂量的 NYMCX-263B HA，包括 FIA。每周间隔给予五次 10 微克剂量的 NYMCX-263B HA，包括 FIA。初次免疫后八周，收集血清并加入NaN3（0.05% w/v）。然后通过 APHIS 批准的灭活 FMDV 方法处理所有血清。收集血清，然后用含有NaN3 (0.05% w/v) 的 PBS 缓冲液 1:4 稀释，过滤并装入 2ml 体积的小瓶中。

5. 存储

推荐的储存温度为+2-8ºC。但是，如果打算长期储存试剂，即 > 2 年，则可以将它们储存在 -20°C。抗血清可以冷冻和解冻对 SRD 测定的使用没有任何不利影响

6. 开瓶指南

NIBSC 16/182 流感抗-A(标准品) 小瓶有螺帽；也可能存在内部塞子。应通过逆时针旋转取下盖子。应注意防止内容物丢失。请注意：如果在取下瓶盖时有塞子，塞子应留在小瓶中或随瓶盖一起取下。

7. 材料的使用

对于 1ml 中含有 20-50μg HA 活性的抗原的测定，应将 15μl-25μl 未稀释的试剂加入 1ml 琼脂糖中。根据使用的 A/Hong Kong/4801/2014 样抗原标准或根据当地实验室条件，可能需要更改抗血清浓度。