NIBSC 19/226 人乳头瘤病毒 (标准品)

1. 预期用途

用于基于核酸的检测的 HPV DNA 基因型 HPV31、HPV33、HPV45、HPV52、HPV58 的第一国际标准集合由 5 个单独的冷冻干燥重组质粒制备物组成，该重组质粒含有规定基因型的全长 HPV DNA。克隆详细信息可在每个国际标准的特定使用说明中找到（NIBSC 代码分别为 14/258、14/260、14/104、14/262、14/264）。每个标准都在纯化的人类基因组 DNA 的背景下配制，冻干成 0.5 ml 等分试样并储存在 -20 °C。这些材料在一项涉及 15 个实验室的国际合作研究中进行了表征（WHO/BS/2019.2360）。

2. 注意

NIBSC 19/226 人乳头瘤病毒 (标准品) 不适用于人类食物链中的人类或动物。

该材料含有来自人类胎盘的 DNA (Sigma, D7011)。与所有生物来源的材料一样，这种制剂应被视为对健康有潜在危害。应根据您自己实验室的安全程序使用和丢弃它。此类安全程序应包括戴防护手套和避免产生气溶胶。打开安瓿或小瓶时应小心谨慎，以免割伤。

3. 单元

第一国际标准的规定单位：

HPV31 DNA (14/258) 为每安瓿 1.6 x 10^7 国际单位 (IU)；

HPV33 DNA (14/260) 为每安瓿 1.6 x 10^7 IU；

HPV45 DNA (14/104) 为每安瓿 1 x 10^7 IU；

HPV52 DNA (14/262) 为每安瓿 7.9 x 10^6 IU；

HPV58 DNA (14/264) 为每安瓿 7.9 x 10^6 IU。

4. 内容

生物材料原产国：英国。

每个安瓿含有冻干的 0.5 mL HPV 质粒 DNA，稀释在 10 mM Tris 缓冲液 pH7.4 中，含有 1 mM EDTA、5 mg/mL 海藻糖和源自胎盘的人 DNA (~1 x 10^6 GEq/mL)。

5. 存储

安瓿瓶在收到时应储存在 -20 °C 或以下。

请注意：由于冻干材料固有的稳定性，NIBSC 可能会在环境温度下运输这些材料。

6. 开瓶指南

DIN 安瓿瓶有一个“易开"颜色的压力点，窄的安瓿杆在此与较宽的安瓿瓶主体相连。各种类型的安瓿破碎机可商购获得。要打开安瓿，轻轻敲击安瓿以收集底部（标记）端的材料，并按照安瓿破碎器随附的制造商说明进行操作。

7. 材料的使用

NIBSC 19/226 人乳头瘤病毒 (标准品) 在重组之前，不应尝试称量冻干材料的任何部分。HPV DNA 的第一个国际标准都包含高拷贝数模板。打开玻璃安瓿时，通过雾化污染 HPV 质粒 DNA 的风险很高。材料必须在单独的实验室环境中打开和处理，远离其他预扩增组件，如试剂、实验室器具和样品。该材料以冻干形式提供，使用前应在 0.5 ml 无菌无核酸酶水中复溶。确保安瓿的内表面被添加的水润湿，以便重组粘附在玻璃上的任何冻干材料颗粒。当按照指示重组时，

14/258 (HPV31) 的终浓度为 3.2 x 10^7 IU/mL；

14/260 (HPV33) 的终浓度为 3.2 x 10^7 IU/mL；

14/104 (HPV45) 的终浓度为 2 x 10^7 IU/mL；

14/262 (HPV52) 的终浓度为 1.6 x 10^7 IU/mL；

14/264 (HPV58) 的终浓度为 1.6 x 10^7 IU/mL。

重组材料适用于校准内部或工作标准，用于扩增和检测 HPV DNA（WHO/BS/2019.2360）。该材料不得用于校准或评估提取、沉淀或离心程序。 NIBSC 可以为在提取步骤无法与扩增步骤分离的分析中使用 HPV DNA 基因型国际标准（例如进样、应答平台）提供指导。该材料尚未针对人类 DNA 核酸扩增技术进行校准。