NIBSC 01/580 凝血酶人(标准品)

1. 预期用途

上述标准已被开发用于替代第一个国际 Alpha 凝血酶标准 (89/588) 和美国标准凝血酶 Lot J。新标准的效力为 110 IU/安瓿，相当于 110 美国单位/安瓿.两种凝血酶国际标准（WHO 国际 Alpha 凝血酶标准，89/588 和美国标准凝血酶，批次 J）库存不足，需要开发替代制剂。两个标准的替换提供了一个机会来开发一个具有共同单位的联合标准，从而消除了由现有单位和标准之间的微小但取决于测定的差异引起的问题（国际标准中的 IU 和美国单位美国标准的情况，通常也称为“NIH 单位"）。组织了一项合作研究，涉及来自全球 15 个国家的 25 个实验室 (1)。国际标准 (89/588) 和美国标准批次 J 与制造商捐赠的两种候选凝血酶制剂一起包括在内。根据这项研究的结果，其中一种制剂 01/580 被选为替代标准，并被规定为 WHO 凝血酶第二国际标准 01/580 和美国 FDA/CBER 凝血酶标准批次K. 国际标准由世界卫生组织生物标准化专家委员会于 2003 年 2 月制定。

2. 注意

NIBSC 01/580 凝血酶人(标准品) 不适用于人类食物链中的人类或动物。

该制剂含有人类来源的材料，最终产品或从中提取的原材料都经过测试，发现 HBsAg、抗 HIV 和 HCV RNA 呈阴性。与所有生物来源的材料一样，这种制剂应被视为对健康有潜在危害。应根据您自己实验室的安全程序使用和丢弃它。此类安全程序应包括戴防护手套和避免产生气溶胶。打开安瓿或小瓶时应小心谨慎，以免割伤。

3. 单元

校准替代凝血酶标准品的合作研究的参与者被要求使用他们常用的试剂执行他们内部的凝血酶效力测定方法。可以使用纤维蛋白原或血浆底物或替代地使用显色方法进行效力测定。如果可能，鼓励参与者执行不止一种方法。使用国际标准和美国标准作为参考标准计算候选材料的效力。还进行了进一步分析以确定是否对所用不同底物的结果有任何影响：人纤维蛋白原、牛纤维蛋白原、血浆和显色底物。研究的结论是候选材料 D，编码 01/580，是国际标准和美国标准的合适替代标准。这种材料的效力是 110 IU/安瓿。该数字是使用来自使用人或牛纤维蛋白原或血浆的所有凝血测定的结果计算的。显色测定的结果未用于计算该值。

不确定性：分配的单元不带有与其校准相关的不确定性。因此，不确定性可能是被认为是安瓿含量的变化，并确定为 +/- 0.07%。

4. 内容

生物材料原产国：英国。

用于制备标准品的纯化凝血酶由制造商慷慨提供，作为人凝血酶的纯化溶液，由混合血浆制备，比活度为 2000-3000 IU/mg。将材料作为冷冻溶液运送至 NIBSC，然后将其解冻并在 10 mM Hepes、pH 7.4、含有 0.15M NaCl 和 5 mg/ml 人白蛋白溶液的溶液中稀释至约 100 IU/ml 的浓度（蛋白酶活性低）。将该溶液以 1 ml 等分试样分配到安瓿中。灌装操作总共得到 9676 个安瓿，平均灌装重量为 1.0061 克（cv = 0.07%）。冷冻干燥后，安瓿的平均干重为 0.0184g (cv = 1.13%)，残留水分为 0.17% (cv = 12.4%)。凝血酶标准的 α 凝血酶含量尚不清楚，但国际合作研究表明，凝血与显色活性的比率与之前的第一个 α 凝血酶国际标准 89/588 (1) 非常相似。

5. 存储

NIBSC 01/580 凝血酶人(标准品)  未开封的安瓿瓶应储存在 –20°C 或以下的黑暗中。

请注意：由于冻干材料固有的稳定性，NIBSC 可能会在环境温度下运输这些材料。

6. 开瓶指南

DIN 安瓿瓶有一个“易开"颜色的压力点，窄的安瓿杆在此与较宽的安瓿瓶主体相连。各种类型的安瓿破碎机可商购获得。要打开安瓿，轻轻敲击安瓿以收集底部（标记）端的材料，并按照安瓿破碎器随附的制造商说明进行操作。

7. 材料的使用

在重新配制之前，不应尝试称量冻干材料的任何部分。安瓿的内容物应溶解在 1 ml 蒸馏水中，所得溶液在冰上储存并在 4 小时内使用。