NIBSC 05/236 抗流感A标准品

1. 预期用途

流感抗血清试剂 05/236 在绵羊中制备，用于 A/Wisconsin/67/2005 样抗原的单径向扩散测定。每次检测都应包含适当的 NIBSC 试剂

2.注意

NIBSC 05/236 抗流感A标准品 不适用于人类食物链中的人类或动物。

该材料不是人或牛来源。与所有生物来源的材料一样，这种制剂应被视为对健康有潜在危害。应根据您自己实验室的安全程序使用和丢弃它。此类安全程序应包括戴防护手套和避免产生气溶胶。开瓶或开瓶时应小心谨慎，以免割伤。

3. 单元

没有为该材料分配单元。

4. 内容

生物材料原产国：英国。

抗血清试剂在绵羊 459、460、461 和 462 中制备为 A/Hiroshima/52/2005 的纯化 HA、IVR-142（与A/Hiroshima/52/2005 的 HA 和 NA 重配）和 NYMCX-161 （从 A/Wisconsin/67/2005 与 HA 和 NA 重配）。通过用菠萝蛋白酶处理从纯化的病毒中提取 HA 抗原，并通过在蔗糖梯度上沉淀纯化 (Brand, CN and Skehel, JJ, Nature, New Biology, 1972, 238, 145-147。绵羊 459 和 460 的免疫计划如下：肌肉注射一剂约 25-50 微克 A/Hiroshima/52/2005 HA 和弗氏*佐剂 (FCA)，两周后用 10- 20 微克剂量的 IVR-142 包括弗氏不*佐剂 (FIA)，另外两个 20 微克剂量的 IVR-142 包括 FIA 以每周间隔给药。初次免疫后五周，收集血清并加入NaN3（0.05% w/v）。

绵羊 461 和 462 的免疫计划如下：肌肉注射约 25-50 微克 A/Hiroshima/52/2005 HA 和弗氏*佐剂 (FCA)，两周后用 10-20包括弗氏不*佐剂 (FIA) 的 NYMCX-161 微克剂量，每周间隔给予两次另外 20 微克剂量的 NYMCX-161 包括 FIA。初次免疫后六周，收集血清并加入NaN3（0.05% w/v）。收集血清，用含有NaN3(0.05% w/v) 的 PBS 缓冲液按 1:5 稀释并装入 2ml 体积的小瓶中。测试的 141 个小瓶的平均重量为 2.05 克，变异系数为 0.99%。

5. 存储

+2-8ºC

请注意：由于冻干材料固有的稳定性，NIBSC 可能会在环境温度下运输这些材料。

6. 开瓶指南

NIBSC 05/236 抗流感A标准品  样品瓶有一个“上翻式"圆形瓶盖。无论是在瓶盖上还是在小瓶的套环上，都标有撬开瓶盖的位置。这暴露了塞子的一个区域，通过该区域可以使用皮下注射针头和注射器进行制剂的重构和取出。如果首先使用移液器，则使用镊子等*取下金属项圈，戴上合适的手套注意避免割伤。取下塞子以便进入。应注意防止内容物丢失。

7. 材料的使用

对于 1ml 中含有 20-50 微克 HA 活性的抗原的测定，应将大约 13μl 未稀释的试剂添加到 1ml 琼脂糖中。可能需要根据当地实验室条件改变抗血清浓度。抗血清试剂 05/236 应按照 Wood, JM, Schild, GC, Newman, RW 和 Seagroatt, VA 所描述的方法使用。