NIBSC 08/142 流感抗血清A(标准品)

1. 预期用途

NIBSC 08/142 流感抗血清A(标准品) 在绵羊中制备，用于 A/Anhui/1/2005 样抗原的单次径向扩散测定。每次检测都应包含适当的 NIBSC 试剂

2. 注意

该制剂不适用于人类食物链中的人类或动物。

该材料不是人或牛来源。与所有生物来源的材料一样，这种制剂应被视为对健康有潜在危害。应根据您自己实验室的安全程序使用和丢弃它。此类安全程序应包括戴防护手套和避免产生气溶胶。打开安瓿或小瓶时应小心谨慎，以免割伤。

3. 单元

没有为该材料分配单元。

4. 内容

生物材料原产国：英国。

抗血清试剂在绵羊 SH477 中制备为 A/Anhui/1/2005 的纯化 HA、IBCDC RG-6（通过反向遗传学制备的重配子）与来自 A/Anhui 的 HA（修饰以去除多碱基切割位点）和 NA /1/2005) 。通过用菠萝蛋白酶处理从纯化的病毒中提取 HA 抗原并通过在蔗糖梯度上沉降来纯化 (Brand, CN and Skehel, JJ, Nature, New Biology, 1972, 238, 145-147。

绵羊 SH477 的免疫计划如下：肌肉注射一剂约 25-50 微克 A/Anhui/1/2005 HA 和弗氏*佐剂，两周后给予 10-20 微克 A /Anhui/1/2005 HA 与弗氏不*佐剂 (FIA)，每周再给予 10 剂 20 微克 A/Anhui/1/2005 HA 与 FIA。初次免疫后十三周，收集血清并加入NaN3（0.05% w/v）。通过维持 pH5.49 40 分钟处理血清，然后恢复原始 pH，然后用含有NaN3 (0.05% w/v) 的磷酸盐缓冲盐水按 1:4 稀释并装入 2ml 体积的小瓶中。

5. 存储

+2-8ºC

请注意：由于冻干材料固有的稳定性，NIBSC 可能会在环境温度下运输这些材料。

6. 开瓶指南

NIBSC 08/142 流感抗血清A(标准品) 样品瓶有一个“上翻式"圆形瓶盖。无论是在瓶盖上还是在小瓶的套环上，都标有撬开瓶盖的位置。这暴露了塞子的一个区域，通过该区域重构和可以使用皮下注射针头和注射器提取制剂。如果首先使用移液器，则使用镊子等*取下金属项圈，戴上合适的手套注意避免割伤。取下塞子以便进入。应注意防止内容物丢失。

7. 材料的使用

对于 1ml 中含有 20-50 微克 HA 活性的抗原的测定，应将大约 20μl 未稀释的试剂添加到 1ml 琼脂糖中。可能需要根据当地实验室条件改变抗血清浓度。抗血清试剂 08/142 应按照 Wood, JM, Schild, GC, Newman, RW 和 Seagroatt, VA 描述的方法使用。