NIBSC 13/182 流感抗B(标准品)

1. 预期用途

流感抗血清试剂 13/182 使用适当的 NIBSC 抗原试剂制备用于 B/Massachusetts/02/2012 抗原的单径向扩散测定。

抗血清试剂在绵羊 586、587、588、589 和 590 中制备到 B/Massachusetts/02/2012 病毒的纯化 HA。通过菠萝.蛋白酶处理从纯化病毒中提取 HA 抗原，并通过蔗糖梯度沉淀纯化 ( Brand, CN 和 Skehel, JJ, Nature, New Biology, 1972, 238, 145-147。

2. 注意

NIBSC 13/182 流感抗B(标准品) 不适用于人类食物链中的人类或动物。

该材料不是人或牛来源。与所有生物来源的材料一样，这种制剂应被视为对健康有潜在危害。应根据您自己实验室的安全程序使用和丢弃它。此类安全程序应包括戴防护手套和避免产生气溶胶。打开安瓿或小瓶时应小心谨慎，以免割伤。

3. 单元

没有为该材料分配单元。

4. 内容

生物材料原产国：英国。

绵羊的免疫计划如下：绵羊586；肌肉注射一剂约 50 µg B/Massachusetts/02/2012 HA 和弗氏*佐剂 (FCA)，两周后给予 10 微克剂量的弗氏不*佐剂 (FIA)。五个另外 10 微克剂量的B/Massachusetts/02/2012 包括 FIA 每周进行一次。初次免疫后八周，收集血清并加入NaN3（0.05% w/v）。绵羊 587 和 588；肌肉注射一剂约 50 µg 的 B/Massachusetts/02/2012 HA 和弗氏*佐剂 FCA），两周后给予 10 微克剂量的弗氏不*佐剂 (FIA)。每周间隔给予六次 10 微克剂量的 B/Massachusetts/02/2012，包括 FIA。初次免疫后九周，收集血清并加入NaN3（0.05% w/v）。绵羊 589 和 590；一剂约 50 µgB/Massachusetts/02/2012 肌内给予含有弗氏*佐剂 (FCA) 的 HA，两周后给予 10 微克剂量的弗氏不*佐剂 (FIA)。每周间隔给予八次 10 微克剂量的 B/Massachusetts/02/2012，包括 FIA。初次免疫后九周，收集血清并加入NaN3（（0.05% w/v）。然后通过 APHIS 批准的灭活 FMDV 方法处理所有五种羊血清。使用的处理方法是维持 pH5.5 或更低至少 30 分钟。收集血清，然后用含有NaN3(0.05% w/v) 的 PBS 缓冲液按 1:2.4 稀释并装入 2ml 体积的小瓶中。

5. 存储

NIBSC 13/182 流感抗B(标准品)  推荐的储存温度为+2-8ºC。但是，如果打算长期储存试剂，即 > 2 年，则可以将它们储存在 -20°C。抗血清可以冷冻和解冻，对 SRD 测定的使用没有任何不利影响。

6. 开瓶指南

小瓶有螺帽；也可能存在内部塞子。应通过逆时针旋转取下盖子。应注意防止内容物丢失。

请注意：如果在取下瓶盖时有塞子，塞子应留在小瓶中或随瓶盖一起取下。

7. 材料的使用

测定 1ml 中含有 20-50 微克 HA 活性的抗原时，应将 12-15μl 未稀释试剂加入 1ml 琼脂糖中。可能需要根据当地实验室条件改变抗血清浓度。