NIBSC 16/114 流感抗-A(标准品)

1. 预期用途

流感抗血清试剂 16/114 使用适当的 NIBSC 抗原试剂制备用于 A/California/7/09 样抗原的单次径向扩散测定。在绵羊 545、546、609 和 613 中制备抗血清试剂使用 A/California/7/09 样病毒的纯化 HA。通过用菠萝蛋白酶处理从纯化的病毒中提取 HA 抗原并通过在蔗糖梯度上沉降来纯化 (Brand, CN and Skehel, JJ, Nature, New Biology, 1972, 238, 145-147。

2. 注意

NIBSC 16/114 流感抗-A(标准品) 不适用于人类或动物人类食物链。

该材料不是人或牛来源。与所有生物来源的材料一样，这种制剂应被视为对健康有潜在危害。应根据您自己实验室的安全程序使用和丢弃它。此类安全程序应包括戴防护手套和避免产生气溶胶。打开安瓿或小瓶时应小心谨慎，以免割伤。

3. 单元

没有为该材料分配单元。

4. 内容

生物材料原产国：英国。

绵羊 545 和 613 的免疫计划如下：肌肉注射一剂约 50 µg A/California/7/09 样病毒 (NIB-74) HA 和弗氏*佐剂 (FCA)，两周后进行含 10 微克剂量的弗氏不*佐剂 (FIA)。每周给予三剂 10 微克的 HA，包括 FIA。初次免疫后六周，收集血清并加入NaN3（0.05% w/v）。

绵羊 546 的免疫计划如下：肌肉内给予一剂约 50 µg A/California/7/09 样病毒 (NIBRG-121xp) HA 和 FCA，两周后给予 10 微克 HA包括国际汽联。每隔一周给予两次 10 微克剂量的 NIBRG-121xp HA 包括 FIA，然后每隔一周给予两次 10 微克剂量的 NIB-74 HA 包括 FIA。随后在 4 周后再服用 10 微克剂量的 NIB-74 HA，包括 FIA，并在每周间隔再服用三剂 NIBRG121xp HA，包括 FIA。初次免疫后十四周，收集血清并加入NaN3（0.05% w/v）。

绵羊 609 的免疫计划如下： 给予一剂约 50 µg 含 FCA 的 NIBRG-121xp HA肌肉注射，两周后使用 10 微克剂量的 FIA。每周间隔给予四次 10 微克剂量的 HA，包括 FIA。初次免疫后七周，收集血清并加入NaN30.05% w/v）。然后通过 APHIS 批准的方法处理每种血清灭活口蹄疫病毒。收集血清，然后用含有NaN3 (0.05% w/v) 的 PBS 缓冲液 1:3 稀释，并装入 2ml 体积的小瓶中。

5. 存储

+2-8ºC

但是，如果打算长期储存试剂，即 >2 年，则可以将它们储存在 -20ºC。抗血清可以冷冻和解冻，对其在 SRD 测定中的使用没有任何不利影响。

6. 开瓶指南

NIBSC 16/114 流感抗-A(标准品)  小瓶有螺帽；也可能存在内部塞子。应通过逆时针旋转取下盖子。应注意防止内容物丢失。请注意：如果在取下瓶盖时有塞子，塞子应留在小瓶中或随瓶盖一起取下。

7. 材料的使用

对于 1ml 中含有 20-50 微克 HA 活性的抗原的测定，应将大约 15-25μl 未稀释的试剂添加到 1ml 琼脂糖中。根据使用的 A/California/7/2009 抗原标准或根据当地实验室条件，可能需要更改抗血清浓度