NIBSC 18/108 流感抗-A(标准品)

1. 预期用途

流感抗血清试剂 18/108 使用适当的 NIBSC 抗原试剂制备用于 A/Singapore/INFIMH-16-0019/2016 样抗原的单次径向扩散测定。

使用 A/Singapore/INFIMH-16-0019/2016 样病毒的纯化 HA 在绵羊 675、676、677、678 和 679 中制备抗血清试剂。通过菠萝蛋白酶处理从纯化病毒中提取HA抗原，并通过蔗糖梯度沉淀纯化（Brand, CN and Skehel, JJ, Nature, New Biology, 1972, 238, 145-147。

2. 注意

NIBSC 18/108 流感抗-A(标准品) 不适用于人类食物链中的人类或动物。

该材料不是人或牛来源。与所有生物来源的材料一样，这种制剂应被视为对健康有潜在危害。应根据您自己实验室的安全程序使用和丢弃它。此类安全程序应包括戴防护手套和避免产生气溶胶。打开安瓿或小瓶时应小心谨慎，以免割伤。

3. 单元

没有为该材料分配单元。

4. 内容

生物材料原产国：英国。

绵羊 675 和 678 的免疫计划如下：肌肉注射一剂约 100 µg A/Singapore/INFIMH-16-0019/2016 样病毒 (NIB-104) HA 和弗氏*佐剂 (FCA)，两周后服用 20 微克剂量的弗氏不*佐剂 (FIA)。一周后给予包括 FIA 在内的另外四剂 20 微克剂量的 NIB-104 HA。初次免疫后七周，收集血清并加入NaN3（0.05% w/v）。

绵羊 676 和 677 的免疫计划如下：肌肉注射一剂约 100 µg A/Singapore/INFIMH-16-0019/2016 样病毒 (NIB-104) HA 和弗氏*佐剂 (FCA)，两周后服用 20 微克剂量的弗氏不*佐剂 (FIA)。一周后给予包括 FIA 在内的另外 6 次 20 微克剂量的 NIB-104 HA。初次免疫后九周，收集血清并加入NaN3（0.05% w/v）。

绵羊 679 的免疫计划如下：肌肉内注射一剂约 100 µg 的 A/Singapore/INFIMH-16-0019/2016 样病毒 (NIB-104) HA 和弗氏*佐剂 (FCA)，随后两次数周后服用 20 微克剂量的弗氏不*佐剂 (FIA)。一周后给予包括 FIA 在内的另外七次 20 微克剂量的 NIB-104 HA。初次免疫后十周，收集血清并加入NaN3（0.05% w/v）。

然后通过 APHIS 批准的灭活 FMDV 方法处理血清。将从 SH675、676、677、678 和 679 获得的抗血清汇集并用含有NaN3(0.05% w/v) 的 PBS 缓冲液按 1:4 稀释，并装入 2ml 体积的小瓶中。

5. 存储

+2-8ºC

但是，如果打算长期储存试剂，即 >2 年，则可以将它们储存在 -20ºC。抗血清可以冷冻和解冻，对其在 SRD 测定中的使用没有任何不利影响。

6. 开瓶指南

NIBSC 18/108 流感抗-A(标准品)  小瓶有螺帽；也可能存在内部塞子。应通过逆时针旋转取下盖子。应注意防止内容物丢失。请注意：如果在取下瓶盖时有塞子，塞子应留在小瓶中或随瓶盖一起取下。

7. 材料的使用

对于在 1ml 中含有 20-50 微克 HA 活性的抗原的测定，应将大约 30-40 ul 未稀释的试剂添加到 1ml 琼脂糖中。根据使用的 A/Singapore-INFIMH-16-0019/2016 样抗原标准或根据当地实验室条件，可能需要更改抗血清浓度。