品牌 | NIBSC | 供货周期 | 现货 |
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应用领域 | 医疗卫生,生物产业 |
1. 预期用途
参考试剂由世界卫生组织 (WHO) 生物标准化专家委员会于 2019 年设立,是世界卫生组织 (WHO) 第一个用于慢病毒载体 (LV) 整合位点分析的国际参考试剂 (RR)。编码安瓿(NIBSC 代码 18/144)包含从人体细胞中提取的冷冻干燥、纯化的基因组 DNA。该材料由外部实验室测试,显示适合作为 LV 整合位点分析的定性参考试剂,对十个定义的 LV 整合位点有信心检测(表 1)。此参考试剂不得用于任何其他目的。数据分析必须集中在慢病毒载体整合上。
2. 注意
NIBSC 18/144 慢病毒载体整合位点(标准品) 不适用于人类食物链中的人类或动物。
该制剂含有人类来源的材料,最终产品或从中提取的原材料都经过测试,发现 HBsAg、抗 HIV 和 HCV RNA 呈阴性。与所有生物来源的材料一样,这种制剂应被视为对健康有潜在危害。应根据您自己实验室的安全程序使用和丢弃它。此类安全程序应包括戴防护手套和避免产生气溶胶。打开安瓿或小瓶时应小心谨慎,以免割伤。
3. 单元
参比试剂在一项涉及来自 13 个国家的 31 个实验室的国际合作研究中进行了测试。从最一致的结果中获得了一致的十个 LV 整合位点。并非所有的集成站点都必须被报告。集成站点的数量是作为信息的参考值提供的,而不是作为正式分配的单位
4。内容
生物材料原产国:英国。
参考试剂含有大约 5 µg 从人类细胞系中提取的冷冻干燥和纯化的基因组 DNA。使用“盐析"方法提取基因组 DNA,并在冷冻干燥前用 5mg/mL 海藻糖在 Tris-EDTA 缓冲液中稀释。
5. 存储
将所有未开封的冻干材料安瓿存放在 -20°C 或以下。
请注意:由于冻干材料固有的稳定性,NIBSC 可能会在环境温度下运输这些材料。
6. 开瓶指南
DIN 安瓿瓶有一个“易开"的彩色应力点,其中狭窄的安瓿杆与较宽的安瓿瓶身相连。各种类型的安瓿破碎机可商购获得。要打开安瓿,轻轻敲击安瓿以收集底部(标记)端的材料,并按照安瓿破碎器随附的制造商说明进行操作。
7. 材料的使用
NIBSC 18/144 慢病毒载体整合位点(标准品) 在重新配制之前,不应尝试称量冻干材料的任何部分
a。如上文第 6 节所述打开安瓿瓶。
b。在室温下重构冻干材料,例如无核酸酶水。
C。让材料在室温下重构 1 小时,然后吸管充分混合。
d。使用移液器将样品转移到无核酸酶管中,确保收集到最大可用体积。
e.重组后,例如200µL/安瓿,无核酸酶水,根据 QuBit 在含有 5mg/mL 海藻糖的 Tris-EDTA 缓冲液(10mM tris,1mMEDTA)中的定量,材料的 gDNA 浓度约为 25ng/µL。不必担心材料中可能出现的白色斑点。
F。能够检测十个定义的 LV 集成站点,以验证最终用户的 LV 集成站点分析研究协议。